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ISRE-Luc/THP-1

CBPB0015

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I. Background
      干擾素(IFN)是一種由單核細胞和淋巴細胞產生的具有多種功能的可溶性糖蛋白,是先天和適應性免疫的關鍵效應分子。IFN 細胞因子根據其結合的不同干擾素受體分為三種類型:I 型、II 型和 III 型。Ⅰ型干擾素的分類較多,包括 IFN-α、IFN-β、IFN-δ、IFN-κ、IFN-ω、IFN-τ、IFN-ε、IFN-ξ 等;Ⅱ型干擾素為 IFN-γ;Ⅲ型干擾素即 IFN-λ,包括IFN-λ1、IFN-λ2 及 IFN-λ3。Ⅰ型干擾素主要功能是抗病毒及抗腫瘤,Ⅱ型干擾素主要功能是誘導主要組織相容性復合體(MHC)類抗原的表達和免疫調節(jié)效應,但其抗病毒作用比Ⅰ型干擾素弱。Ⅲ型 INF 為 2003 年發(fā)現的一種新型干擾素,具有廣譜的抗病毒及免疫調節(jié)活性。
 
      配體結合后,I 型和 II 型受體均被激活,導致受體亞基二聚化和重排,從而通過自身磷酸化激活相關 JAK,并進一步激活 STAT 蛋白。磷酸化后,激活的 STAT 形成同型二聚體,然后轉位到細胞核中,在那里啟動 IFN 刺激基因的轉錄。
I 型干擾素還可誘導 ISGF3 復合物的形成,該復合物由 STAT1、STAT2 和 IRF9 組成。ISGF3 復合物與 ISRE(干擾素刺激反應元件)結合,進一步誘導啟動子內含有 ISRE 的干擾素刺激基因的轉錄。
 
      IFNγ 與 IFNγ 受體結合導致下游 STAT1 在 Tyr701 位點發(fā)生酪氨酸磷酸化。產生磷酸化的 STAT1 同型二聚體轉位至細胞核并與 GAS(IFNγ 激活位點)元件結合,從而誘導 IFNγ 調控基因的表達。
 
II. Description
      ISRE-Luc THP-1 報告基因細胞是由 ISRE 調控并表達 Luc 熒光素酶報 告基因的 THP-1 細胞。IFN 與受體結合,激活 ISRE 的原理見下圖所示。
 


Figure 1. ISRE-Luc THP-1 細胞模型原理圖
 
III. Introduction
Host Cell: ISRE-Luc
Expressed gene: THP-1
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: RPMI-1640+ 10% heat-inactivated fetal bovine serum+0.05 mM 2-mercaptoethanol+1 µg/mL puromycin
Mycoplasma Testing: Negative
Storage: Liquid nitrogen
 
IV. Description of Host Cell Line
Organism: Homo sapiens, human
Tissue: peripheral blood
Disease: acute monocytic leukemia
Morphology: monocyte
Growth Properties: suspension
 
V. Representative Data


Figure 2. Dose Response of recombinant Human IFN in ISRE-Luc THP-1.
 

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